Ультраструктурный анализ слезной жидкости у пациентов с диабетической ретинопатией

Авторы: Григорьева А.Е.¹, Еремина А.В.², Тамкович С.Н.³, Черных В.В.⁴, Власов В.В.⁵, Рябчикова Е.И.⁶

Реферат

Цель исследования – определить ультраструктурные характеристики слезной жидкости у пациентов с диабетической ретинопатией. Материал и методы. Слезную жидкость собирали у пациентов с диабетической ретинопатией и здоровых людей, исследовали методом негативного контрастирования в электронном микроскопе Jem 1400. Выделяли фракцию экзосом и исследовали ее компоненты. Результаты и обсуждение. Показана пригодность слезной жидкости для ультраструктурного анализа ее компонентов и выделения экзосом. Выявлены рост концентрации экзосом, изменение их морфологии, а также изменение содержания других микрочастиц и макромолекулярных агрегатов в слезной жидкости больных диабетической ретинопатией.

Тэги

диабетическая ретинопатия, микрочастицы., слезная жидкость, электронная микроскопия

Список литературы

1. Григорьева А.Е., Еремина А.В., Дружинин И.Б. и др. Диагностический потенциал электронно-микроскопического анализа слезной жидкости людей // Офтальмохирургия. 2013. (4). 104–107.

2. Черных В.В., Братко В.И., Лысиков А.Г., Трунов А.Н. Влияние эфферентных и лимфотропных технологий на течение патологического процесса при диабетической ретинопатии // Офтальмохирургия. 2008. (3). 4–7.

3. Черных В.В., Шваюк А.П., Горбенко О.М. и др. Особенности патогенеза начальной и развитой стадии первичной открытоугольной глаукомы // Аллергол. иммунол. 2006. (1). 28–31.

4. Якушев Д.Ю., Бойко Э.В., Позняк А.Л. и др. Содержание провоспалительных цитокинов в слезной жидкости и сыворотке крови пациентов с глаукомой и катарактой // Актуальные проблемы офтальмологии: сб. науч. работ. М., 2011. 283–284.

5. Bello V., Mattei G., Mazzoldi P. et al. Transmission electron microscopy of lipid vesicles for drug delivery: comparison between positive and negative staining // Microsc. Microanal. 2010. 16. (4). 456–461.

6. Echouffo-Tcheugui J.B., Ali M.K., Roglic G. et al. Screening intervals for diabetic retinopathy and incidence of visual loss: a systematic review // Diabet. Med. 2013.

7. Herber S., Grus F.H., Sabuncuo P. et al. Two-dimensional analysis of tear protein patterns of diabetic patients // Electrophoresis. 2001. 22. (9). 1838–1844.

8. Holly F.J., Lemp M.A. Tear physiology and dry eyes // Surv. Ophthalmol. 1977. 22. (2). 69–87.

9. Jeganathan V.S. Evaluation of Digital Fundus images as a diagnostic method for surveillance of diabetic retinopathy // Mil. Med. 2008. 173. (12). xvi–xvii.

10. Li J., Sherman-Baust C.A., Tsai-Turton M. et al. Claudin-containing exosomes in the peripheral circulation of women with ovarian cancer // BMC Cancer. 2009. 9. 244. doi: 10.1186/1471-2407-9-244.

11. Li X., Wang Z. Prevalence and incidence of retinopathy in elderly diabetic patients receiving early diagnosis and treatment // Exp. Ther. Med. 2013. 5. (5). 1393–1396.

12. Looze C., Yui D., Leung L. et al. Proteomic profiling of human plasma exosomes identifies PPARgamma as an exosome-associated protein // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2009. 378. (3). 433–438.

13. Nichols B.A., Chiappino M.L., Dawson C.R. Demonstration of the mucous layer of the tear film by electron microscopy // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1985. 26. (4). 464–473.

14. Ohshima K., Inoue K., Fujiwara A. et al. Let-7 microRNA family is selectively secreted into the extracellular environment via exosomes in a metastatic gastric cancer cell line // PLoS One. 2010. 5. (10). e13247.

15. Park K.S., Kim S.S., Kim J.C. et al. Serum and tear levels of nerve growth factor in diabetic retinopathy patients // Am. J. Ophthalmol. 2008. 145. (3). 432–437.

16. Prunotto M., Farina A., Lane L. et al. Proteomic analysis of podocyte exosome-enriched fraction from normal human urine // J. Proteomics. 2013. 82. 193–229.

17. Stolwijk T.R., Kuizenga A., van Haeringen N.J. et al. Analysis of tear fluid proteins in insulin-dependent diabetes mellitus // Acta Ophthalmol. (Copenh). 1994. 72. (3). 357–362.

18. van der Pol E., Hoekstra A.G., Sturk A. et al. Optical and non-optical methods for detection and characterization of microparticles and exosomes // J. Thromb. Haemost. 2010. 8. (12). 2596–2607.

19. van Haeringen N.J., van Agtmaal E.J. Fibrinoytic activity in human tears // Exp. Eye Res. 1989. 48. (3). 461–464.

20. Vijan S., Hofer T.P., Hayward R.A. Cost-utility analysis of screening intervals for diabetic retinopathy in patients with type 2 diabetes mellitus // JAMA. 2000. 283. (7). 889–896.

21. Yang C., Robbins P.D. The roles of tumor-derived exosomes in cancer pathogenesis // Clin. Dev. Immunol. 2011. 2011. 842–849.

22. Zhou L., Beuerman R.W. Tear analysis in ocular surface diseases // Prog. Retin. Eye Res. 2012. 31. (6). 527–550.

23. Zhu C.H., Zhang S.S., Kong Y. et al. Effects of intensive control of blood glucose and blood pressure on microvascular complications in patients with type II diabetes mellitus // Int. J. Ophthalmol. 2013. 6. (2). 141–145.

Об авторах (для корреспонденции):

Григорьева А.Е. – аспирант, e-mail: feabelit@mail.ru

Еремина А.В. – врач-офтальмолог, e-mail: sci@mntk.nsk.ru

Тамкович С.Н. – к.б.н., е-mail: s.tamk@niboch.nsc.ru

Черных В. В. – д.м.н., проф., директор, e-mail: rimma@mntk.nsk.ru

Власов В.В. – академик РАН, директор, е-mail: vvv@niboch.nsc.ru

Рябчикова Е.И. – д.б.н., проф., руководитель группы микроскопических исследований, e-mail: lenryab@yandex.ru

Полный текст

5-3-2014.pdf

Поступило: 10/02/2015