УДК 617.735
Конструирование трансплантатов донорского ретинального пигментного эпителия методом трехмерного клеточного культивирования
Принадлежность авторов1ФГБУ МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова Минздрава России, 127486, г. Москва, Бескудниковский б-р, 59а
2ФГБУ МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова Минздрава России, 127486, г. Москва, Бескудниковский б-р, 59а
3ФГБУ МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова Минздрава России, 127486, г. Москва, Бескудниковский б-р, 59а
4 ФГБУ НИИ общей патологии и патофизиологии РАМН, 125315, г. Москва, ул. Балтийская, 8
5 ФГБУ НИИ общей патологии и патофизиологии РАМН, 125315, г. Москва, ул. Балтийская, 8
6 ФГБУ НИИ общей патологии и патофизиологии РАМН, 125315, г. Москва, ул. Балтийская, 8
Реферат
Цель исследования – изучить процесс формирования трансплантатов донорского ретинального пигментного эпителия в форме сфероидов (округлых клеточных масс). Материал и методы. Клетки донорского ретинального пигментного эпителия последовательно культивировали в двухмерных, а затем в трехмерных условиях. Использовали методы световой микроскопии, цифровой фотографии и обработки изображений. Результаты и обсуждение. В течение первых 48 часов трехмерного культивирования происходило формирование сфероидов различной морфологии. Сфероиды с «гладкой» поверхностью проявили большую динамичность поведения по сравнению со сфероидами с «бахромчатой» поверхностью.
Тэги
Список литературы1. Achilli T.M., Meyer J., Morgan J.R. Advances in the formation, use and understanding of multi-cellular spheroids // Expert Opin. Biol. Ther. 2012. (10). 1347–1360.
2. Caramoy A. A reply to human retinal pigment epithelium (RPE) transplantation: outcome after autologous RPE-choroid sheet and RPE cell-suspension in a randomised clinical study // Br. J. Ophthalmol. 2011. 95. (3). 431.
3. Cheng N.C., Chen S.Y., Li J.R., Young T.H. Short-term spheroid formation enhances the regenerative capacity of adipose-derived stem cells by promoting stemness, angiogenesis, and chemotaxis // Stem Cells Transl. Med. 2013. 2. (8). 584–594.
4. Diniz B., Thomas P., Thomas B. et al. Subretinal implantation of retinal pigment epithelial cells derived from human embryonic stem cells: improved survival when implanted as a monolayer // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2013. 54. (7). 5087–5096.
5. Falkner-Radler C.I., Krebs I., Glittenberg C. et al. Human retinal pigment epithelium (RPE) transplantation: outcome after autologous RPE-choroid sheet and RPE cell-suspension in a randomised clinical study // Br. J. Ophthalmol. 2011. 95. (3). 370–375.
6. Foty R. A simple hanging drop cell culture protocol for generation of 3D spheroids // J. Vis. Exp. 2011. 6. (51). pii. 2720.
7. Lin R.Z., Chang H.Y. Recent advances in three-dimensional multicellular spheroid culture for biomedical research // Biotechnol. J. 2008. (9–10). 1172–1184.
8. Tezel T.H., Del Priore L.V. Reattachment to a substrate prevents apoptosis of human retinal pigment epithelium // Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 1997. 235. (1). 41–47.
9. Thomson H.A., Treharne A.J., Backholer L.S. et al. Biodegradable poly(α-hydroxy ester) blended microspheres as suitable carriers for retinal pigment epithelium cell transplantation // J. Biomed. Mater. Res. A. 2010. 15. 95. (4). 1233–1243.
10. Uebersax E.D., Grindstaff R.D., Defoe D.M. Survival of the retinal pigment epithelium in vitro: comparison of freshly isolated and subcultured cells // Exp. Eye Res. 2000. 70. (3). 381–390.
11. Yaji N., Yamato M., Yang J. et al. Transplantation of tissue-engineered retinal pigment epithelial cell sheets in a rabbit model // Biomaterials. 2009. 30. (5). 797–803.
Об авторах (для корреспонденции):
Борзенок С.А. – д.м.н., зав. Центром фундаментальных и прикладных медико-биологических проблем, проф. кафедры глазных болезней, e-mail: mdborzenok@narod.ru
Попов И.А. – аспирант Центра фундаментальных и прикладных медико-биологических проблем, e-mail: ilya_doctor_popov@mail.ru
Островский Д.С. – младший научный сотрудник Центра фундаментальных и прикладных медико-биологических проблем
Сабурина И.Н. – д.б.н., зав. лабораторией клеточной биологии и патологии развития, проф. кафедры патофизиологии
Кошелева А.В. – к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории клеточной биологии и патологии развития
Зурина И.М. – младший научный сотрудник лаборатории клеточной биологии и патологии развития
Полный текст