Получение рекомбинантных химерных полипептидов на основе белков BmpA, p83 и OspC сибирских изолятов Borrelia garinii и Borrelia afzelii и исследование их иммунохимических свойств

Авторы: Караваев В.С.¹, Рябченко А.В.², Беклемишев А.Б.³

Реферат

Области генов, кодирующие зрелые белки BmpA, p83 и OspC, были амплифицированы методом ПЦР, встроены в экспрессирующий вектор pETm и клонированы в клетках E. coli. Получены штаммы E. coli – продуценты химерного полипептида BmpA-p83, включающие эпитопы зрелых белков BmpA и p83 изолятов B. garinii, а также химерный полипептид OspCg-OspCa, с эпитопами зрелого белка OspC изолята B. garinii и фрагмента белка OspC изолята B. afzelii. Продемонстрирована способность химерных полипептидов специфически связывать антитела сывороток больных Лайм-боррелиозом. Результаты свидетельствуют о перспективности использования полученных химер в серодиагностике иксодового клещевого боррелиоза.

Тэги

B. burgdorferi s.l, иксодовый клещевой боррелиоз, иммуноферментный анализ, рекомбинантный химерный полипептид, серодиагностика

Список литературы

1. Караваев В.С., Рябченко А.В., Беклемишев А.Б. Иммунохимический анализ рекомбинантных белков OspC западносибирских изолятов Borrelia garinii и Borrelia afzelii // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2010. (1). 20–23.

2. Караваев В.С., Генина Е.С., Рябченко А.В., Беклемишев А.Б. Значимость рекомбинантных белков западносибирских изолятов Borrelia burgdorferi s.l. для серодиагностики иксодового клещевого боррелиоза // Клин. лаб. диагностика. 2014. (6). 44–48.

3. Караваев В.С., Рябченко А.В., Беклемишев А.Б. Конструирование штамма Е. coli – продуцента химерного полипептида на основе ОspС сибирских изолятов Borrelia afzelii и Borrelia garinii и оценка антигенной активности рекомбинантного химера // Междунар. журн. фундамент. и прикл. исслед. 2015. (11-14). 534–537.

4. Манзенюк И.Н., Манзенюк О.Ю. Клещевые боррелиозы. Кольцово, 2005. 85 с.

5. Пат. 2514230 РФ. Рекомбинантные химерные полипептиды, несущие эпитопы различных иммунодоминантных белков спирохет комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato и способ диагностики иксодового клещевого боррелиоза / А.Б. Беклемишев, А.В. Рябченко, В.С. Караваев; Опубл. 03.03.2014.

6. Рябченко А.В., Караваев В.С., Беклемишев А.Б. Сравнительный структурный и иммунохимический анализ рекомбинантных антигенов OspC новосибирских изолятов спирохет Borrelia garinii и Borrelia afzelii // Бюл. СО РАМН. 2010. (2). 6–12.

7. Фоменко Н.В., Мельникова О.В., Черноусова Н.Я., Ерихина Т.И. Выявление антител к боррелиям комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato // Бюл. сиб. мед. 2008. (Прил. 1). 78–84.

8. Baranova E., Solov’ev P., Panfertsev E. et al. Rational design of antigens to improve the serodiagnosis of tick-borne borreliosis in central regions of Russia // Adv. Exp. Med. Biol. 2014. 807. 9–21.

9. Gomes-Solecki M.J., Dunn J.J., Luft B.J. et al. Recombinant chimeric Borrelia proteins for diagnosis of Lyme disease // J. Clin. Microbiol. 2000. 38. (7). 2530–2535.

10. Kenedy M.R., Lenhart T.R., Akins D.R. The role of Borrelia burgdorferi outer surface proteins // FEMS Immunol. Med. Microbiol. 2012. 66. (1). 1–19.

11. Verma A., Brissette C.A., Bowman A., Stevenson B. Borrelia burgdorferi BmpA is a laminin-binding protein // Infect. Immun. 2009. 77. (11). 4940–4946.

12. Wilske B.V., Fingerle U., Schulte-Spechtel U. Microbiological and serological diagnosis of Lyme borreliosis // FEMS Immunol. Med. Microbiol. 2007. 49. (1). 13–21.

Об авторах (для корреспонденции):

Караваев В.С. – к.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории генной инженерии, e-mail: v_karavaev1@mail.ru

Рябченко А.В. – к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории медицинской биотехнологии, e-mail: borrelia.ru

Беклемишев А.Б. – д.б.н., зав. лабораторией генной инженерии, e-mail: beklem@acagem.ru

Поступило: 27/12/2016