ИЗУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАНТНОГО АПОЛИПОПРОТЕИНА А-I КАК ПЕРЕНОСЧИКА ПЛАЗМИДНЫХ ДНК НА МОДЕЛИ ГЕПАТОЦИТОВ КРЫС

Авторы: Рябченко А.В.¹, Котова М.В.², Трифонова Н.В.³, Князев Р.А.⁴, Поляков Л.М.⁵

Реферат

Цель исследования – получение модифицированного варианта аполипопротеина А-I и изучение его способности переносить плазмидные ДНК в гепатоциты крыс в сравнении с нативной формой белка. Материал и методы: клонирование генов и получение рекомбинантных белков в E. coli, инкубирование белков в комплексе с плазмидой pTagGFP2-С in vitro на гепатоцитах крыс с последующим анализом клеток методом проточной цитометрии. Результаты и обсуждение. Модифицированный вариант апо А-I (на С-конце белка добавлены 10 аминокислотных остатков лизина) проникал в гепатоциты, специфически связывался с плазмидной ДНК, но не трансфицировал плазмиду в клетки.

Тэги

аполипопротеин А-I, трансфекция, плазмида, гепатоциты

Список литературы

1. Панин Л.Е., Гимаутдинова О.И., Кузнецов П.А., Величко Е.Ю., Базалук В.В. Структура сайтов взаимодействия ДНК эукариот с комплексами стероидный гормон–аполипопротеин A-I // Молекул. биология. 2007. 41. (4). 583–588.

2. Панин Л.Е. Князев Р.А., Суменкова Д.В., Гуща Р.С., Поляков Л.М. Роль аполипопротеина Е в регуляции биосинтеза белка и нуклеиновых кислот в культуре гепатоцитов крыс // Сиб. науч. мед. журн. 2007. 27. (1). 63–66.

3. Розенкранц А.А., Уласов А.В., Сластникова Т.А., Храмцов Ю.В., Соболев А.С. Использование процессов внутриклеточного транспорта для доставки лекарств в заданный компартмент клетки // Биохимия. 2014. 79. (9). 1148–1168.

4. Рябченко А.В., Караваев В.С., Беклемишев А.Б. Сравнительный структурный и иммунохимический анализ рекомбинантных антигенов OspC новосибирских изолятов спирохет Borrelia garinii и Borrelia afzelii // Сиб. науч. мед. журн. 2010. 30. (2). 6–12.

5. Рябченко А.В., Котова М.В., Поляков Л.М. Конструирование суперпродуцента рекомбинантного аполипопротеина А-I человека на основе клеток Escherichia coli // Сиб. науч. мед. журн. 2015. 35. (6). 16–21.

6. Соловьева В.В., Кудряшова Н.В., Ризванов А.А. Перенос рекомбинантных нуклеиновых кислот в клетки (трансфекция) с помощью гистонов и других ядерных белков // Гены и клетки. 2011. 6. (3). 29–40.

7. Canine B.F., Hatefi A. Development of recombinant cationic polymers for gene therapy research // Adv. Drug Deliv. Rev. 2010. 62. (15). 1524–1529.

8. Canine B.F., Wang Y., Hatefi A. Biosynthesis and characterization of a novel genetically engineered polymer for targeted gene transfer to cancer cells // J. Control. Release. 2009. 138. (3). 188–196.

9. Farve G., Tazi K., Le G., Bennis F., Hachem H., Soula G. High density lipoprotein3 bindings sites are related to DNA biosynthesis in the adenocarcinoma cell line A549 // J. Lipid. Res. 1993. 34. (7). 1093–1106.

10. Jung H.J., Hwang D.S., Wei Q.D., Cha H.J. Carassius auratus-originated recombinant histone H1 C-terminal peptide as gene delivery material // Biotechnol. Prog. // 2008. 24. (1). 17–22.

11. Nouri F., Wang X., Dorrani M., Karjoo Z., Hatefi A. A recombinant biopolymeric platform for reliable evaluation of the activity of pH-responsive amphiphile fusogenic peptides // Biomacromolecules. 2013. 14. (6). 2033–2040.

12. Ray M., Tang R., Jiang Z., Rotello V.M. Quantitative tracking of protein trafficking to the nucleus using cytosolic protein delivery by nanoparticle-stabilized nanocapsules // Bioconjug. Chem. 2015. 26. (6). 1004–1007.

13. Ryabchenko A.V., Kotova M.V., Tverdohleb N.V., Knyazev R.A., Polyakov L.M. Production and analysis of biological properties of recombinant human apolipoprotein A-I // Bull. Exp. Biol. Med. 2015. 160. (1). 129–133.

14. Soltani F., Sankian M., Hatefi A., Ramezani M. Development of a novel histone H1-based recombinant fusion peptide for targeted non-viral gene delivery // Int. J. Prarm. 2013. 441. (1). 307–315.

Об авторах (для корреспонденции):

Поляков Л.М. – д.м.н., проф., зав. лабораторией медицинской биотехнологии, e-mail: plm@niibch.ru

Полный текст

snmzh_6-2017_ryabchenko_i_dr.pdf

Поступило: 10/01/2018